纯化正常兔IgG,DEAE层析+免疫电泳双重质控
一、产品概述由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的纯化正常兔lgG5mg/ml货号P120-101为从正常兔血清中分离纯化的总免疫球蛋白GIgG经离子交换层析纯化未偶联任何标签或标记物。正常兔IgG广泛用作免疫检测实验中的阳性对照、同型对照或封闭试剂用于评估非特异性背景或验证实验体系的有效性。本产品浓度为5 mg/ml缓冲液为含叠氮化钠的磷酸盐缓冲液PBS可在2–8°C稳定保存2年。二、关键规格参数 | 详细信息物种 | 兔表位标签 | 无同型 | IgG偶联物 | 未偶联纯度 | 纯化非亲和纯化采用分级分离DEAE层析浓度 | 5 mg/ml保存条件 | 2 – 8 °C有效期 | 收货后2年缓冲液 | 磷酸盐缓冲液PBS含0.09%叠氮化钠三、产品形式与组成本品以液体形式提供溶于磷酸盐缓冲液PBSpH 7.2–7.4并加入0.09%叠氮化钠作为防腐剂。总蛋白浓度为5 mg/ml基于IgG在280 nm处吸光系数A280 1.41 mg/ml IgG。包装规格未明确列出通常根据订单提供不同体积如1 mg、5 mg、10 mg等请以实际产品标签为准。四、生产与纯化工艺纯化方法本产品通过分级分离fractionation 结合DEAE二乙氨乙基离子交换层析从正常兔血清中分离获得。该工艺可有效去除血清中的白蛋白、其他球蛋白IgA、IgM及非蛋白组分获得高纯度的总IgG。浓度测定采用比尔定律Beer’s Law测定蛋白质浓度设定1 mg/ml IgG在280 nm波长处的吸光度为1.4。根据实际测得的A280值计算浓度浓度mg/ml A280 / 1.4五、质量控制免疫电泳验证为确认产品纯度和免疫学特性生产商对纯化产物进行了免疫电泳分析结果表明1. 与抗兔IgG特异性血清反应证实该产物为兔IgG。2. 不与抗兔IgA或抗兔IgM血清反应排除了IgA和IgM的污染表明纯度良好。3. 与抗兔全血清反应产生单一沉淀弧该沉淀弧与抗IgG血清产生的沉淀弧一致进一步确认产物仅为IgG无其他血清蛋白残留。六、储存与稳定性保存条件2–8°C严禁冷冻。反复冻融会导致蛋白变性、聚集或活性丧失。有效期自收货之日起2年在未受污染且正确储存条件下。防腐剂0.09%叠氮化钠可抑制微生物生长。注意叠氮化钠对HRP有抑制作用如用于HRP检测系统请确保充分洗涤如需去除叠氮化钠可使用脱盐柱或透析。七、ELISA阳性对照1. 用PBS将本产品稀释至1–10 µg/ml100 µl/孔包被ELISA板4°C过夜。2. 洗涤、封闭后加入稀释后的抗兔IgG-HRP二抗如1:5000。3. 孵育后洗涤加底物显色。应出现明显阳性信号。八、同型对照流式细胞术1. 将本产品与实验一抗稀释至相同浓度如2 µg/ml。2. 分别取等体积对照抗体和实验抗体加入至不同样本管中4°C孵育30分钟。3. 洗涤后加入荧光标记的抗兔IgG二抗检测信号。同型对照管应给出背景荧光水平。九、相关产品推荐抗兔IgG全分子HRP偶联物用于WB/ELISA检测抗兔IgG轻链特异性HRP偶联物用于IP-WB避免重链干扰正常山羊/小鼠IgG用于不同物种的同型对照本产品为经过严格质控的纯化正常兔IgG浓度高、纯度高、稳定性好是免疫学实验中可靠的对照试剂。